聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是基因工程中常用的一種分子生物學(xué)技術(shù)，PCR管通過模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過程快速合成特定DNA片段。其原理基于DNA的復(fù)制過程，包括三個(gè)步驟：變性、退火和延伸。
 

　　變性(Denaturation)階段，反應(yīng)體系中的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)在高溫(通常為94°C-98°C)下被分離成兩條單鏈DNA。這一步是通過加熱使兩條DNA鏈斷裂，目的是將DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂溄Y(jié)構(gòu)以提供模板。
 

　　退火(Annealing)階段，溫度被降低至50°C-65°C，此時(shí)引物(Primers)能夠與目標(biāo)DNA序列的互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合，因?yàn)橐锱c目標(biāo)DNA序列的堿基配對具有特異性。引物的選擇是PCR反應(yīng)設(shè)計(jì)中重要的一環(huán)，其長度一般為18-30個(gè)堿基，并且具有雙鏈DNA穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。引物的位置決定了擴(kuò)增片段的大小。
 

　　延伸(Extension)階段，延伸溫度一般設(shè)定在72°C，本階段需要一種特殊的酶——DNA聚合酶(DNApolymerase)。在該酶的催化下，引物結(jié)合至目標(biāo)DNA上時(shí)，DNA聚合酶會從引物的3’端開始合成新的DNA鏈，直到達(dá)到目標(biāo)DNA的3’端為止。該酶使用反應(yīng)體系中的四種核苷酸(dNTPs)作為合成材料，并且能夠識別引物與DNA模板的堿基配對，使目標(biāo)DNA的兩條鏈都得到復(fù)制。
 

　　PCR管的維護(hù)保養(yǎng)方法：
 

　　1.使用前檢查完整性，確保沒有破損或污染。
 

　　2.避免將暴露在強(qiáng)光下，以免對PCR反應(yīng)產(chǎn)生干擾。
 

　　3.存放時(shí)，應(yīng)避免存放在高溫或陽光直射的地方。
 

　　4.使用塑料架或托盤來保護(hù)，避免直接接觸硬表面，防止破損。
 

　　5.在退出蓋前，確保已經(jīng)降溫，以避免熱氣壓的影響導(dǎo)致樣品飛濺。
 

　　6.定期檢查標(biāo)記是否清晰可讀，如有磨損或模糊應(yīng)及時(shí)更換。
 

　　7.避免使用廢舊，以免可能存在的殘留對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾。