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血清的保存與分裝

更新時(shí)間:2025-11-25點(diǎn)擊次數(shù):316
  關(guān)于血清的保存條件,這是一個(gè)非常重要且常見的問題。正確的保存是保證血清質(zhì)量和細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。
 
  以下是血清保存條件的詳細(xì)說明,主要針對(duì)最常見的胎牛血清,其他類型血清(如小牛血清、馬血清等)也適用類似原則。
 
  一、血清保存的核心原則:避免反復(fù)凍融
 
  反復(fù)凍融是損害血清質(zhì)量的最主要因素。它會(huì)導(dǎo)致:
 
  蛋白質(zhì)變性、沉淀。
 
  營養(yǎng)成分降解。
 
  生長因子活性喪失。
 
  增加沉淀物的形成。
 
  二、血清的建議存儲(chǔ)溫度與解凍
 
  1.儲(chǔ)存:建議將血清儲(chǔ)存在-15℃~-20℃。
 
  Ps:已開封血清的保存
 
  最佳實(shí)踐:分裝!分裝!分裝!
 
  這是保護(hù)血清活性最有效的方法。收到血清后,在首次解凍后立即進(jìn)行無菌分裝。
 
  分裝體積:根據(jù)您每次實(shí)驗(yàn)的常用量(如 50mL/管),確保每管能在短時(shí)間內(nèi)用完。
 
  儲(chǔ)存:將分裝好的血清立即放回-20°C或-80°C冷凍。使用時(shí)取出一管,其余血清仍處于未解凍狀態(tài)。
 
  2. 解凍:不建議于4℃過夜解凍,也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍,因?yàn)槿粞鍥]有混勻,底部的蛋白會(huì)變性形成沉淀。
 
  血清解凍的方法(三步法)
 
  三、 可能出現(xiàn)的問題:血清沉淀物
 
  血清在儲(chǔ)存和解凍過程中出現(xiàn)沉淀是常見現(xiàn)象,主要有:
 
  脂蛋白聚合物:顯微鏡下可見的小黑點(diǎn),通常不影響細(xì)胞生長。
 
  磷酸鈣結(jié)晶:外觀像白色碎片或絮狀物,可能影響細(xì)胞生長。
 
  纖維蛋白:肉眼可見的絮狀沉淀。
 
  如果沉淀量不多,無需特別處理。如果量多,建議過濾后使用。
 
  四、總結(jié):最佳操作流程
 
  收貨檢查:收到血清后,檢查包裝是否完好,立即根據(jù)計(jì)劃儲(chǔ)存于-20°C。
 
  首次處理:使用時(shí),從冰箱取出,置于4°C 過夜解凍。
 
  立即分裝:解凍后,在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行無菌分裝至多個(gè)小體積無菌離心管中。

 


 
  冷凍儲(chǔ)存:將分裝管立即放回-20°C冷凍。
 
  日常使用:每次實(shí)驗(yàn)取出一管分裝血清,在4°C解凍或室溫水浴快速解凍后使用。已解凍的血清如在1個(gè)月內(nèi)不能用完,建議丟棄或重新過濾后4°C短期保存。
 
  遵循以上保存條件,可以最大限度地維持血清的生物學(xué)活性,確保您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。
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