百奧益康試劑盒使用指南(通用流程)

更新時(shí)間：2025-08-11

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　　以下是百奧益康通用型試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)操作流程及關(guān)鍵注意事項(xiàng)(以細(xì)胞培養(yǎng)類試劑為例，適用于多數(shù)產(chǎn)品線)

　　一、百奧益康試劑盒操作前準(zhǔn)備

　　1. 試劑復(fù)溫/解凍

　　- 細(xì)胞培養(yǎng)基、血清等置于 2-8℃緩慢解凍(24小時(shí)) 或 37℃水浴快速解凍(≤15分鐘)，解凍后立即使用。

　　- 凍干粉試劑(如細(xì)胞因子)用指定緩沖液復(fù)溶，輕柔渦旋，避免泡沫。

　　2. 設(shè)備預(yù)冷/消毒

　　- 超凈臺紫外滅菌30分鐘，移液器、離心管等表面酒精擦拭。

　　- 磁珠分選類試劑需提前將分離架置于4℃預(yù)冷。

　　二、百奧益康試劑盒核心操作流程

　　> 以"細(xì)胞刺激/培養(yǎng)試劑盒"為例

　　1. 樣本處理

　　- 分離PBMC或靶細(xì)胞，用預(yù)冷PBS洗滌2次(300g, 5分鐘)，重懸于百奧益康專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

　　2. 試劑配制

　　- 按說明書比例配制工作液(例：刺激因子母液+培養(yǎng)基稀釋)，現(xiàn)配現(xiàn)用。

　　- 關(guān)鍵點(diǎn)：含蛋白組分避免反復(fù)凍融；促生長因子需避光。

　　3. 細(xì)胞刺激/培養(yǎng)

　　- 將細(xì)胞懸液加入預(yù)鋪工作液的培養(yǎng)板(密度：5×10?/mL)，輕搖混勻。

　　- 培養(yǎng)條件：37℃, 5% CO?, 95%濕度，定期觀察形態(tài)。

　　4. 結(jié)果檢測

　　- 收集細(xì)胞：72小時(shí)后離心(300g, 10分鐘)，取上清測因子分泌(ELISA)或細(xì)胞裂解液測通路蛋白(WB)。

　　三、百奧益康試劑盒磁珠分選類試劑盒特殊步驟（如免疫細(xì)胞分選）

　　1. 抗體標(biāo)記

　　- 每10?細(xì)胞加 10μL抗體混合液，4℃避光孵育 10分鐘。

　　2. 磁珠結(jié)合

　　- 加 5μL磁珠/10?細(xì)胞，混勻后4℃孵育 15分鐘。

　　3. 磁性分離

　　- 置分離柱于磁場中，上樣后收集流穿液(目標(biāo)細(xì)胞)，用緩沖液沖洗3次。

　　四、百奧益康試劑盒關(guān)鍵注意事項(xiàng)

　　五、百奧益康試劑盒故障排查速查表

　　- 細(xì)胞活性低 → 檢測試劑pH(標(biāo)準(zhǔn)7.2-7.4)及內(nèi)毒素(<0.1EU/mL)

　　- 分選純度不足 → 確認(rèn)抗體用量及孵育溫度(嚴(yán)格4℃)

　　- 試劑沉淀 → 37℃溫浴5分鐘并渦旋(某些生長因子需過濾除菌)

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