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什么是熒光原位雜交？
2023-08-23
熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，是20世紀(jì)80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。目前這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動(dòng)植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體精細(xì)結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)和基因組進(jìn)化研究待許多領(lǐng)域。FISH的基本原理是用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針，按照堿基互補(bǔ)的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行異性結(jié)合，形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核...
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蛋白質(zhì)定量有哪些方法？
2023-08-22
蛋白定量是蛋白分離和分析前必須的一個(gè)重要步驟，蛋白色譜分離、蛋白質(zhì)電泳分析、蛋白質(zhì)免疫分離和分析、細(xì)胞裂解釋放的總蛋白定量、蛋白分子的標(biāo)記、蛋白結(jié)構(gòu)分析等，都需要可靠的定量分析作為基礎(chǔ)。蛋白定量分析應(yīng)用的領(lǐng)域包括生物科學(xué)，食品檢驗(yàn)，臨床檢驗(yàn)等等。蛋白質(zhì)定量有哪些方法？讓我們一起來看看吧！一、比色法蛋白定量常使用的方法是比色法，通常用于總蛋白的定量分析。根據(jù)蛋白和比色試劑的結(jié)合，可以將比色法分為：蛋白-染料結(jié)合法和蛋白-銅螯合化學(xué)試劑法。前者對(duì)應(yīng)的典型蛋白定量比色法是考馬斯亮藍(lán)...
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WB實(shí)驗(yàn)中條帶不跑歪的秘訣
2023-08-21
在做Westernblot實(shí)驗(yàn)時(shí)，你一定會(huì)遇到各式各樣的條帶，最常見的就是條帶跑歪了，如凹型條帶、凸型條帶、斜條帶、條帶拖尾等。如何更好的做好WB實(shí)驗(yàn)，讓我們一起來看看WB實(shí)驗(yàn)中條帶不跑歪的秘訣吧！一、凹凸條帶的原因和解決辦法可能原因：可能是由于膠未配好（凝膠未能wan全聚合，膠中有顆?；驓馀?，凝膠未冷卻好，），也可能是電壓過高。解決方法：正確添加質(zhì)量合格且未過期的AP及TEMED；過濾配膠的試劑保證配膠過程中膠內(nèi)無氣泡；凝膠冷卻好后再上樣；降低電壓。二、條帶出現(xiàn)黑點(diǎn)或黑斑的...
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Q-pcr 和 RT-pcr 有啥區(qū)別？
2023-08-21
Q-PCR和RT-PCR都是分子生物學(xué)中常用的技術(shù)，用于檢測(cè)和定量特定的核酸序列。Q-pcr和RT-pcr有啥區(qū)別？它們的原理和應(yīng)用類型相同嗎？今天讓我們一起來了解一下吧！一、Q-pcr和RT-pcr原理上的不同Q-PCR也是基于PCR的技術(shù)，但它引入了熒光探針或熒光染料來實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)的進(jìn)程。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與目標(biāo)序列的數(shù)量成正比，因此可以定量地測(cè)量起始樣品中的目標(biāo)核酸數(shù)量。RT-PCR結(jié)合了逆轉(zhuǎn)錄（ReverseTranscription）和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的過...
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PolyPlus轉(zhuǎn)染試劑jetPRIME®產(chǎn)品問題匯總
2023-08-18
問題一：化合物Q：INTERFERin®是什么類型的化合物？A：INTERFERin®是新一代的非脂質(zhì)體陽離子兩性分子轉(zhuǎn)染試劑，專為培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的siRNA轉(zhuǎn)染而開發(fā)。使用INTERFERin®，加入1nM的siRNA就能達(dá)到90%以上的沉默效率。問題二：細(xì)胞Q:INTERFERin®已成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系有哪些？A:INTERFERin®已被成功用于多種貼壁細(xì)胞和非貼壁細(xì)胞系，例如HeLa，HEK-293,A549MDA-MB-23...
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CRISPR Cas9酶是一種基因編輯工具
2023-08-18
CRISPRCas9酶是一種基因編輯工具，用于修改生物體的基因組。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一種存在于細(xì)菌和古細(xì)菌中的一類DNA序列，而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR系統(tǒng)中的一種酶。從細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)的一種天然的免疫系統(tǒng)，用于抵御病毒入侵。它通過記錄病毒的DNA片段，并將其整合到自身的基因組中，形成CRISPR序列。當(dāng)同一病毒再次入侵時(shí)，CR...
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原代細(xì)胞如何獲?。?/a>
2023-08-17
原代細(xì)胞(primarycell)：是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞的獲取難度大、需要考慮的問題多，原代細(xì)胞如何獲??？原代細(xì)胞的獲取，就是從活體上將組織分解成單個(gè)細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)的過程，且整個(gè)過程要求無菌操作。具體要考慮的問題有：組織分解的方式，培養(yǎng)的時(shí)間，換液時(shí)間，細(xì)胞狀態(tài)判斷和凍存。一、...
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懸浮細(xì)胞如何進(jìn)行傳代培養(yǎng)？
2023-08-16
懸浮細(xì)胞傳代是一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)操作,它可以幫助研究人員擴(kuò)增和維持細(xì)胞株。懸浮細(xì)胞如何進(jìn)行傳代呢？一、懸浮細(xì)胞的傳代懸浮細(xì)胞傳代比貼壁細(xì)胞傳代稍微簡單一些。由于細(xì)胞已經(jīng)在生長培養(yǎng)基中懸浮，因此無需通過酶的作用使其從培養(yǎng)容器表面脫離，整個(gè)過程較為迅速，對(duì)細(xì)胞的損傷也較小。懸浮生長細(xì)胞的傳代培養(yǎng)要比貼壁細(xì)胞簡單得多，通常有兩種方法。1.直接給帶傳代的培養(yǎng)瓶中補(bǔ)充一定量的新鮮.培養(yǎng)基，然后將進(jìn)行分裝。2.先通過離心棄掉營養(yǎng)匱乏的舊培養(yǎng)基，然后再用適量的新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀，最后將其分...
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